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CATALOGO PRODOTTI:

IPP AB purification

Resine per Immunoprecipitazione e Ab Purification


La purificazione di Anticorpi è possibile attraverso l’utilizzo di tecniche Cromatografiche che sfruttano l’interazione delle immunoglobuline con proteine batteriche immobilizzate su resina d’agarosio.

L’immunoprecipitazione ne è un applicazone particolare  in quanto permette, a partire ad es. da un lisato,  di separare una proteina di interesse preventivamente riconosciuta da un anticorpo e indagare sul suo interattoma.

Per la purificazione di anticorpi si sfruttano le differenti proprietà di 3 tipi di proteine batteriche ricombinanti immobilizzate su agarosio crosslinked:

rProtein A (da Staphylococcus aureus), rProtein G (proteina espressa da alcuni ceppi di stafilococco) e rProtein L (da Peptostreptococcus magnus).

 

ABT produce Resine in Agarosio Ultrapuro ideali per Immunoprecipitazione e Ab Purification con caratteristiche di STABILITA’ e HIGH BINDING per una miglior resa proteica.

ABT (www.abtbeads.com)  produce resine ideali per le diverse esigenze di purificazione:

 


• coniugate con rProtein A, rProtein G o rProtein L

• ad Elevato Medio cross-link

• in formato Bulk

• in Colonnine per purificazione per gravità

• in Cartridge compatibili con MPLC, FPLC e AKTA™ Design

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FAQ:


1. A cosa si riferisce il livello di Cross-link delle Beads di Agarosio?

Successivamente al processo di sintesi e polimerizzazione, le beads di agarosio subiscono un processo di cross-linking.

Le maglie di agarosio all'interno di ciascuna biglia vengono rafforzate con legami crociati più o meno forti. Più forte è il livello di legami crociati, maggiore sarà la resistenza delle beads ad una eventuale pressione esercitata. 

 

2. Qual è la differenza tra le resine High Pressure Rapid Run© e le Low Pressure?

Le beads RapidRun© di Agarosio al 6% hanno elevato cross-link che offre maggior resistenza alla pressione e appositamente studiate per purificazioni tipo FPLC o per centrifugazione. Le minori dimensioni delle beads (Ø 20-50 μm) permettono un flusso rapido durante la purificazione. Disponibili anche in Cartridges pre-impaccate compatibili con (MPLC, FPLC, AKTA™ Design) o in bulk da impaccare.

 

Le beads Low Pressure sono anch'esse in Agarosio al 6% e hanno diametro maggiore (Ø 50-150 μm). A differenza delle RapidRun© hanno medio cross-link, e rappresentano una soluzione più economica per chi esegue Immunoprecipitazioni o Ab purification su colonnina a bassa pressione (gravity flow) o in batch. Disponibili in colonnine o in sospensione (bulk).

 

Le differenze tra le beads sono schematizzate qui di seguito:


SPECIFICATIONS

PROTEIN A AGAROSE

(Low pressure)

RAPID RUN™ PROTEIN A AGAROSE

(High Pressure)

RAPID RUN™ PROTEIN G AGAROSE

(High Pressure)

PROTEIN L AGAROSE

(Low Pressure)

BEAD GEOMETRY/SIZE

Spherical;

50-150 μm

Spherical;

20-50 μm

Spherical;

50-150 μm

Spherical;

50-150 μm

CROSSLINK

Yes

Highly Crosslinked

Highly Crosslinked

Yes

BEAD AGAROSE %

4%

6%

4%

4%

LIGAND DENSITY

~3 mg rProtein A

/ ml resin

~3 mg rProtein A

/ ml medium

~3 mg rProtein G

/ ml resin

~3,5 mg rProteinL

/ ml resin

BINDING CAPACITY

~25 mg human IgG / ml resin

~ 25 mg human IgG / ml medium

~20 mg human IgG / ml resin

~10 mg human IgG / ml resin

ANTIMICROBIAL AGENT

20% Ethanol

20% Ethanol

20% Ethanol

20% Ethanol

STORAGE

2-8 °C

2-8 °C

2-8 °C

2-8 °C

PRODUCT

Suspension - Columns

Cartridges*

Suspension - Columns

Suspension

 

3. Perchè si usano diverse proteine batteriche per purificare anticorpi? 

La scelta di utilizzare rProtein A, rProtein G o rProtein L dipende dal tipo di IgG da purificare. Le diverse proteine batteriche, infatti, hanno differenti affinità per differenti IgG. Per scegliere le beads di agarosio idonee alla propria purificazione, seguire le indicazioni della tabella.